Superovulación de vacas donantes de embriones utilizando una o dos aplicaciones de hormona folículo estimulante

Abstract

El objetivo de esta tesis fue evaluar la respuesta superovulatoria en donantes de embriones tratadas con aplicaciones reducidas de FSH diluida en una formulación de liberación lenta a base de ácido hialurónico (AH). En el experimento 1, se evaluó la vía de administración de la FSH diluida en AH en una sola aplicación. No hubo diferencias en el número de embriones transferibles entre las vacas del grupo Control (8 aplicaciones de FSH diluida en solución fisiológica cada 12 h y por 4 días; 10,3 ± 3,4) y las tratadas con FSH diluida en HA y administrada por via intramuscular (i.m.; 5,0 ± 1,7); pero el número de embriones fue menor (1,3 ± 1,1; P<0,05) con la administración subcutánea. En el experimento 2, se compararon dos concentraciones distintas de AH (10 o 20 mg/mL) por vía i.m. en una sola aplicación. La FSH diluida en la solución más concentrada de AH resultó en un mayor número de embriones transferibles (6,8 ± 0,8 y 2,9 ± 0,7 respectivamente, P<0,05). En el experimento 3 se comparó un tratamiento de una sola aplicación i.m. de FSH diluida en una solución 20 mg/mL de AH con la de un protocolo superestimulatorio Control (8 aplicaciones de FSH cada 12 h por 4 días). No se encontraron diferencias (P>0,05) entre los dos protocolos en el numero de embriones transferibles obtenidos (7,1 ± 1,3 y 5,3 ± 0,8; respectivamente). El experimento 4 tuvo como objetivo evaluar la respuesta superovulatoria de donantes Angus, Brangus y Bonsmara tratadas con distintas dosis de FSH diluida en AH (20 mg/mL) y administrada en una única inyección por vía i.m. o de FSH diluida en solución fisiológica y administrada en 8 inyecciones cada 12 h y por 4 días. Los resultados obtenidos sugieren que las dosis adecuadas para dichas razas son 300, 260 y 200 mg respectivamente. A pesar de que estos resultados demostraron que una sola aplicación de FSH diluida en 20 mg/mL de AH resulta en una satisfactoria respuesta superovulatoria, la solución de AH es demasiado viscosa y difícil de mezclar con la FSH. Para evitar esto se realizó el experimento 5 para evaluar concentraciones más bajas de AH (10 y 5 mg/mL) pero en dos aplicaciones cada 48 h. No hubo diferencias en el número de embriones transferibles en las vacas tratadas con el tratamiento Control (6,7 ± 1,3) y las tratadas con dos aplicaciones cada 48 h de FSH en AH (8,9 ± 1,4 y 9,3 ± 1,9 para 10 y 5 mg/mL, respectivamente). Por último, el experimento 6 tuvo como objetivo evaluar la eficacia de la dilución de FSH en 5 mg/ml AH y administrado en dos aplicaciones i.m. cada 48 hs, luego de haber sido refrigerada o congelada por dos semanas. No se VI encontraron diferencias entre los distintos métodos de conservación de la dilución (P>0,05). En conclusión la superestimulación con una o dos aplicaciones de FSH diluida en AH resulta en una producción de embriones transferibles similar a la de un tratamiento tradicional de dos inyecciones i.m. 2 veces al día durante 4 días.

The aim of this thesis was to evaluate the superovulatory response in donors treated with reduced applications of FSH diluted in a slow release formulation based on hyaluronic acid (HA). Experiment 1, was designed to evaluate the route of administration (i.m. or s.c.) of FSH diluted in AH in a single injection. There were no differences in the number of transferables embryos between cows in the Control group (8 twice-daily administrations of FSH diluted in saline for 4 days; 10.3 ± 3.4) and those treated with FSH diluted in HA and administered intramuscularly (i.m.; 5.0 ± 1.7); however, the number of transferable embryos was lower in those that were treated subcutaneously (1.3 ± 1.1; P<0.05) Experiment 2 was designed to compare two concentrations of HA (20 mg/mL or 10 mg/mL) in a single i.m. injection. The FSH diluted in the more concentrated HA solution resulted in more (P<0.05) transferable embryos (2.9 ± 0.7 and 6.8 ± 0.8, for 10 mg/mL and 20 mg/mL, respectively). Experiment 3 was designed to compare superovulatory response in donor cows treated with a single i.m. injection of Folltropin-V diluted in 20 mg/ml of HA with those treated with the Control protocol (8 twice-daily i.m. injections for 4 days). No difference (P>0.05) in the number of transferable embryos was found between the two treatments (7.1 ± 1.3 and 5.3 ± 0.8, respectively. Experiment 4 was designed to compare superovulatory responses in Angus, Brangus and Bonsmara donor cows following the use of different dosages of FSH diluted in HA given as a single i.m. administration or by multiple i.m. injections. Results suggest that the appropriate dosages for each breed are 300, 260 and 200 mg, respectively. Although these results demonstrated that a single administration of FSH diluted in 20 mg/mL HA results in a satisfactory superovulatory response, the AH solution was too viscous and difficult to mix with the FSH. Therefore, Experiment 5 was designed to evaluate superovulatory response in beef cows treated with two i.m. injections (48 h apart) of FSH diluted in reduced AH concentrations (10 mg/mL or 5mg/mL). No differences (P=0.32) were found in the number of transferable embryos in cows in the Control group (6.7 ± 1.3) and those treated with FSH diluted in an AH solution and given in two i.m. injections (8.9 ± 1.4 and 9.3 ± 1.9 for 10 mg/mL and 5 mg/mL, respectively). Finally, Experiment 6 was designed to investigate the efficacy of FSH-AH solution after storage in the freezer or in the refrigerator for two weeks. There were no significant differences among groups (P>0.05). In conclusion, superstimulation by one or two injections of FSH diluted in AH results in similar number of embryos than the traditional treatment in which FSH is administered in twice-daily i.m. injections for 4 days.