Evaluación de la sobreexpresión del oncogen Her-1 por inmunohistoquímica como factor pronóstico en cáncer de cuello uterino

Abstract

OBJETIVOS: la Investigación consiste en conocer cuál es el porcentaje de Sobreexpresión del Her 1 en la cohorte de estudio, evaluar y comparar la Correlación existente entre la Sobreexpresión del mismo con una posible afectación de la Sobrevida Libre de enfermedad, su relación como Factor Predictor y Tiempo a la Recidiva, tanto Local como a Distancia como así también si existe alguna relación entre su sobreexpresión y la posibilidad de afectación de la Sobrevida Global. Todas las variables de estudio, comparadas con el grado de sobreexpresión del oncogen manifestado a través de todas las posibles Intensidades de Tincion de 0+ a 3+.Tambien correlacionar la sobreexpresión del Her 1 con Factores histopronosticos considerados adversos y que influyen directamente con el objetivo primario que pudieran afectar el periodo libre de enfermedad tanto como la Sobrevida Global. MÉTODOS Y MATERIALES: Se realizo un Estudio prospectivo de cohorte. Se extrajeron muestras de 39 tacos tumorales y los datos de las Historia Clínicas de pacientes atendidas en el Hospital Nacional de Clínicas y Sanatorio Allende con Cáncer Invasor de Cuello y que fueron sometidas a tratamiento quirúrgico. El procesamiento de los tacos tumorales de la sobreexpresión de Her1, se llevaron a cabo en el Laboratorio de Anatomía Patológica del Hospital Privado, se utilizaron muestras de tejidos fijados en formol al 10% y embebidos en parafina y se realizaron cortes de 4 – 5 micras. Para la recuperación antigénica de los cortes para Her1 se utilizo buffer citrato ph6 marca dako. RESULTADOS: El porcentaje de pacientes que sobre expresaron en Her1 fue del 63.9%; el 23% del total 1+, 17.9% 2+ y un 23% de 3+. Se observo una relación directa entre la Sobreexpresión de Her 1 con intensidad de tinción de 2+ y 3+ y el acortamiento del tiempo a la recidiva. Con 3+ el tiempo promedio fue de 9 meses, con 2+ fue de 17 meses y con ausencia de sobreexpresión de 17.7 meses, comportándose este como un factor de Riesgo de acortamiento del Tiempo Libre de Enfermedad. Cuando se evaluó Mortalidad, si bien no hubo una diferencia estadísticamente significativa entre las distintas Intensidad de tinción del Her1 y la posibilidad de morir como factor univariable de estudio, se encontró una muy clara la tendencia de Riesgo, a mayor expresión del Her1 mayores posibilidades de morir por la enfermedad, un 36.4% de muertes en el grupo no sobre expresado y un 50% de pacientes muertas en el grupo que mostro sobreexpresión máxima del oncogén. El 100% de las pacientes que se presentaron con tumores localmente avanzados (Mayores a 4cms y/o compromiso inicial de parámetros) tenia sobreexpresión del Her1 con (3+) lo cual demuestra una fuerte asociación con la presentación de los tumores en Estadios mas avanzados, mientras que cuando la tinción fue 0 en la que resulto 36.4% en Tumores iniciales y 63.6% localmente avanzados. En cuanto al tamaño tumoral, el 65.8% de los Tumores con 3+ mostraron un promedio de 65mm, en cambio con 2+ un promedio de 12mm de tamaño tumoral, 1+ un promedio 8mm y con una marcación de 0+ un promedio de 13mm (p=0.012). Al estudiar la correlación con la Profundidad de Invasión Tumoral se encontró que con 3+ hubo una invasión miocervical de 2.7cm en promedio, 2+ de 1.17 , el de 1+ 0.88 y 1.45cm para 0+. Cuando se evaluó invasión tumoral de mitad interna vs mitad externa, se observo que las que tenían 3+ tenían capacidad de penetración del tumor en profundidad mucho mayor con una p=0.032 al compararlo con 2+, 1+ y 0+. El Compromiso Parametrial tuvo una asociación proporcional, cuando fue 0+ el 28.6% de tuvo parametrios comprometidos, con una 1+ 22.2%, con 2+ el 42.9% y con 3+ el 50%. Por otra parte se observo una relación directa en la proporción de Tumores con Alto recuento mitótico e intensidad de marcación Sobreexpresión del Her1. El 66.7% de la población con Tumores de Alto recuento mitótico presentaron 3+, en cambio un 50% de esta población tuvo 2+, un 42.9% 1+ y solo 20% marcación 0+. Cuando se comparo la ocurrencia de tumores G3 (indiferenciados) y la expresión del Her1, se observo una fuerte asociación. Solo el 15.4% de los tumores que fueron 0+ mostraron G3, mientras que el 44.4% de los que presentaron 1+ tuvieron G3, 71.4% de los que tuvieron 2+ y el 44.4% de los que presentaron máxima intensidad de tinción tuvieron tumores indiferenciados. Con respecto a la relación de la Sobreexpresión del Her1 y la presencia de Invasión Vasculolinfatica (IVL) no se obtuvieron hallazgos significativos tampoco se pudo mostrar asociación de Sobreexpresión del Her1 con mayor tasa de metastasis ganglionares. CONCLUSIONES: si bien muchas de las variables no resultaron estadísticamente significativas, la tendencia es muy clara y hablaría de que a una mayor sobreexpresión del Her1 podría haber mayor crecimiento tumoral con presentaciones de tumores mas grandes al momento diagnostico, como así también mayor asociación a presentación en Estadios localmente avanzados, seguramente explicado por la asociación a factores de mal pronóstico como son el Alto Recuento Mitótico y Mayor grado de Indiferenciación celular. Resulto lógico de esperar la asociación a mayor profundidad de invasión en el estroma cervical y mayor porcentaje de parametrios comprometidos. Encontrándose así la Sobreexpresión del Her1 como un factor desfavorable especialmente con mayor intensidad de Tinción, con afectación del tiempo a la recidiva y la Sobrevida Global. A su vez podría tenerse en cuenta dentro de las variables histopronosticas e incluirlo como un factor más de decisión terapéutica, especialmente referido a Adyuvancia. Y por último la posibilidad de evaluar la Sobreexpresión del Her1 a través de la Inmunohistoquimica abre la puerta a la posibilidad futura de tratamiento con terapias targets para este subgrupo de pacientes que deberá ser evaluado en Estudios prospectivos de investigación

OBJECTIVES: knowing which is the percentage of Overexpression of Her1 in the study cohort, evaluating and comparing the Correlation existing between its Overexpression and a possible affectation of Free From Illness Survival, its relationship as a Predictive Factor and Time to Recurrence, Local as well as at a Distance, and also whether there exists any relationship between its Overexpression and the chance of affectation of Global Survival.All of the study variables, compared to the degree of overexpression of the oncogen shown through all the possible Intensities of staining from 0+ to 3+. Also to correlate the overexpression of Her1 with histopronostic Factors considered adverse and that directly influence on the primary objective that could affect the free from illness period as well as Global Survival. METHODS AND MATERIALS: A cohort prospective study was carried out. Samples from 39 tumor tacos were extracted, and the data from Clinic Histories of patients with invasive cervix cancer treated in the Hospital Nacional de Clinicas and Sanatorio Allende, and that underwent surgical treatment. The processing of tumor tacos of the overexpression of Her1 was carried out in the Pathological Anatomy Laboratory of the Hospital Privado, samples of tissues fixed in formalin at 10% were used, and embedded in paraffin, and 4-5 micron cuts were made. For the antigenic retrieval of these cuts for Her1, ph6 citrate buffer Dako brand was used. RESULTS: The percentage of patients that overexpressed in Her1, was of 63.9 %; 23% of the total 1+, 17.9 % 2+, and 23% 3+. A direct relationship was observed between Overexpression of Her 1 with staining intensity of 2+ and 3+ and the shortening of time to recurrence. With 3+, the average time was of 9 months, with 2+ of 17 months, and with absence of overexpression of 17.7 m0nths, this one behaving as a Risk Factor of shortening of the Free From Illness Time. When Mortality was evaluated, even though there was not a statistically significant difference among the different staining Intensities of Her1 and the possibility of dying as a study factor, a very clear tendency of Risk was found: the higher the expression of Her1 the bigger the chances of dying due to the illness, a 36.4 of deaths in the not overexpressed group, and a 50% of patients dead in the group that showed maximum overexpression of the oncogen. A 100% of patients who showed up with tumors locally advanced ( bigger than 4cms and /or initial parametrial engagement) had 3+ overexpression of Her1, which shows a strong association with the presentation of tumors in more advanced stages, whereas when staining was 0 in which it resulted 36.4% in initial tumors, and 63. 6% locally advanced. As regards tumor size, 65.8% of tumors with 3+ showed an average of 65mm; instead with 2+, an average of 12mm tumor size, 1+ an 8mm average, and a marking of 0+ a 13mm average ( p= 0.012). When studying the correlation with the Depth of Tumoral Invasion it was found that with3+ there was an average myocervical invasion of 2.7cm, 2+ of 1.17, that of 1 0.88, and 1.45cm for 0+. It was observed that patients that had 3 (+) showed tumor penetration at a much higher depth than those who had less intensity of expression of Her1 = p=0.32. The Parametrial engagement had a proportional association, when it was 0+ 28.6 % of had engaged parametria, with 1+ 22.2%, with 2+ 42.9%, and 3+ 50%. On the other hand, a direct relationship was observed in the proportion of Tumors with high mitotic count and intensity of marking overexpression of Her1. 66.7% of the population with High mitotic count Tumors showed 3+, instead a 50% of this population had 2+, 42.9% 1+, and only 20% o+ marking. When occurrence of G3 tumors (undifferentiated) and expression of Her1 were compared, a strong association was observed. Only 15.4% of tumors that were 0+ showed G3 , while 44.4% of those which showed maximum staining intensity had undifferentiated tumors. As regards the relationship of Overexpression of Her1 and the presence of vasculolymphatic invasion (VLI ) no significant findings were obtained , nor association of Overexpresssion of Her1 with a higher rate of nodal metastases could be shown. CONCLUSIONS: Although many of the variables were not statistically significant, the tendency is very clear and it would tell that at a higher overexpression of her1 there could be a higher tumor growth with presentation of bigger tumors at diagnosis time, as well as also a higher association to presentation at locally advanced stages, surely explained by the association to bad prognosis factors such as High Mitotic Count and a Higher degree of cell Undifferentiation. It was logical to expect the association between higher depth of invasion in cervical stroma and a higher percentage of parametria engaged. It was found, thus, the overexpression of her1 as an unfavorable factor, especially with higher staining intensity ,with affectation of time to recurrence and Global Survival. At the same time, it could be taken into account within the histopronostics variables , and include it as one more factor of therapeutic decision, especially referred to Adjuvance. And finally, the possibility of evaluating Overxpression of Her1 through Immunohistochemistry opens the door to the future possibility of treatment with target theraoies for this subgroup of patients that will have to be evaluated in prospective research studies.