Efecto del tratamiento con hCG y progesterona sobre la tasa de preñez en receptoras de embriones bovinos

Abstract

El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar si la aplicación intrauterina de progesterona disuelta en un polímero en el momento de la transferencia del embrión realizada en novillas o la administración de 2000 UI de hCG cuatro días antes de la transferencia del embrión, repercuten en las tasas de preñez frente a un grupo Control que no recibe ningún tipo de suplementación exógena. Para este efecto se utilizaron 3 grupos, el Grupo Control (n=100) que no tuvo ninguna intervención, el Grupo hCG (n=086) al cual se le aplicaron 2000 UI de hCG (hCG; Fertivet Chalver, Colombia) cuatro días antes de la transferencia y el grupo Polímero (n=100) al que se le adicionó a la pajilla que contenía el embrión producido in vitro, una columna con 2,5 mg de progesterona disueltos en un biopolímero. Los tres grupos fueron sometidos a un proceso de sincronización que iniciaba el Día 0 con la inserción de un dispositivo intravaginal con progesterona (DIB 0,5 g, Syntex SA, Argentina) y 2 mg de benzoato de estradiol (BE, Benzoato de Estradiol, Syntex, Argentina). En el Día 8 se removieron los DIB y se administró 500μg de Cloprostenol (PGF2α; Ciclase DL, Syntex, Argentina), 0,5 mg de Cipionato de estradiol (CPE; Cipyosin, Syntex, Argentina), 400 UI de gonadotrofina Coriónica equina (eCG; SincroeCG, Ourofino, Brasil). El Día 17 se transfirieron los embriones. Todas las hormonas se administraron por vía intramuscular profunda con agujas calibre 18 x 1.5 y jeringas de 3 y 5 ml. Se tomaron muestras de sangre en el 7 % de las receptoras, para medir la cantidad de progesterona el día de la transferencia y los días 14 y 21 posteriores a la misma. Las muestras fueron tomadas a 7 animales del Grupo Control, 7 del Grupo Polímero y 8 del Grupo hCG. En la presente investigación, se observó que la tasa de preñez del grupo hCG fue superior (40,7%) al grupo Control (30,0%) y al grupo Polímero (20,0%), demostrando que la aplicación de progesterona intrauterina puede tener un efecto negativo sobre la tasa de preñez. El análisis estadístico demostró que la única variable que influyó en el porcentaje de preñez fue el grupo. Ninguna de las otras variables influyó, y no hubo efecto de las interacciones. La formación de cuerpos lúteos accesorios que pudieron ser detectados por ecografía diagnosticada el día de la transferencia, fue escasa, de 286 hembras transferidas sólo se diagnosticaron 6 cuerpos lúteos accesorios, equivalente al 2% de los animales transferidos. En cuanto a los niveles de progesterona en sangre se evidenció una caída en los niveles de esta hormona hacia el día 14 posterior a la transferencia del embrión, y luego un ascenso en los niveles de la misma hacia el día 21. Lo anterior puede constituir una tendencia interesante a incrementar la progesterona mediante la aplicación intrauterina, aunque no es concluyente dada la varianza presentada en los resultados y el tamaño de la muestra. En promedio el Grupo Polímero presentó unos niveles inferiores (6,2 ng/ ml) el día 0 o día de la transferencia del embrión, a partir del día 14 se observó un aumento significativo (7,8 ng/ ml). Los grupos hCG y Control tuvieron un nivel superior (10 a 12 ng/ml) en el día 0 y una caída más significativa hacia el día 14 (6,0 a 7,0 ng/ml) y se mantuvieron los mismos niveles hasta el día 21.

The objective of this research was to determine whether the intrauterine application of progesterone dissolved in a polymer at the moment of the embryo transfer in heifers and the application of 2000 IU of hCG four days before the embryo transfer, affect the pregnancy rates against a control group that does not receive any type of exogenous supplementation. For this effect, 3 groups were used, Group 1 or control (n=100), group that did not have intervention, Group 2 or hCG group (n=086) to which 2000 IU of hCG (hCG, Fertivet, Chalver, Colombia) were applied four days before the embryo transfer and Group 3 or Polymer Group (n=100) to wish was added to the straw containing the embryo produced in vitro, a column with 2.5 mg of progesterone dissolved in a biopolymer, the three groups underwent a synchronization process that began on Day 0 with the insertion of an intravaginal device with progesterone (DIB 0.5 g, Syntex SA, Argentina) and 2 mg of estradiol benzoate (BE, Benzoate of Estradiol, Syntex, Argentina). On Day 8, the DIBs were removed and 500 μg of Cloprostenol (PGF2α, Cyclase DL, Syntex, Argentina), 0.5 mg of estradiol cypionate (CPE, Cipyosin, Syntex, Argentina), 400 IU of equine chorionic gonadotropin were administered (eCG; SincroeCG, Ourofino, Brazil). On Day 17 the embryos were transferred. All hormones were administered by deep intramuscular injection with 18 x 1.5 gauge needles and 3 and 5 ml syringes. Blood samples were taken in 7% of the recipients, to measure the amount of progesterone on the day of the transfer and on days 14 and 21after the same. The samples were taken from 7 animals of the Control Group, 7 animals from the Polymer Group and 8 from the hCG Group. In the present investigation, it is observed that the pregnancy rate of group 2 or hCG Group was higher (40.7%) to group # 1 or Control Group (30%) and to group # 3 or Polymer Group (20%), demonstrating that the application of intrauterine progesterone can have a negative effect on the pregnancy rate. The statistical analysis showed that the only variable that influenced the percentage of pregnancy was the group. None of the other variables influenced, and there was no effect of the interactions. The formation of accessory corpus luteum that could be detected by ultrasound diagnosed on the day of the transfer were scarce. Of 286 transferred females, only 6 accessory luteal bodies were diagnosed, equivalent to 2% of the transferred animals. Regarding the levels of progesterone in blood, a drop in the levels of this hormone towards the 14th day after the embryo transfer is evidenced, and then a rise in the levels of the same towards day 21. The previous thing can constitute a interesting tendency to increase progesterone through intrauterine application, although it is not conclusive given the variance presented in the results and the sample size. On average, the Polymer Group presented lower levels (6,2 ng/ml) towards day 0 or day of the embryo transfer, from day 14 it presented a significant increase (7,8 ng/ml). The hCG and Control Groups had a higher level (10 to 12 ng/ml) on day 0 and a more significant fall towards day 14 ( 6,0 to 7,0 ng/ml) and the same levels were maintained until the day 21.