Evaluación de la actividad de nanopartículas de plata (AgNPs) como nuevos agentes anti-Trypanosoma cruzi

Abstract

Nanopartículas de plata (AgNPs) fueron obtenidas mediante síntesis natural a partir de un extracto de achicoria (Cichorium intybus) para probar su efecto parasiticida sobre epimastigotes y tripomastigotes de la cepa Y de Trypanosoma cruzi (TcII). La producción de AgNPs se realizó mediante reacciones de oxido-reducción a partir de nitrato de plata (AgNO3). Se caracterizaron el tamaño medio y concentración de las nanopartículas obtenidas. Se ensayó la citotoxicidad sobre la línea celular Vero proveniente de mono verde africano (Cercophitecus aethiops) mediante la técnica de captación del rojo neutro. La actividad en epimastigotes se evaluó mediante la exposición durante 96 h a diluciones seriadas de AgNPs a partir del nivel de máxima concentración no citotóxica (MCNC) reportada en el test de citotoxicidad. La actividad oxidativa fue cuantificada con la sonda H2DCFDA usando espectrofluorimetría. Se realizó microscopía de fluorescencia sobre los epimastigotes tratados con la IC50 de AgNPs y grupos control a las 96 h. La actividad en tripomastigotes se realizó con un ensayo en sangre de ratón obtenida a los 15 días post infección. Las AgNPs producidas presentaron una absorbancia máxima a una longitud de ≈440nm. El tamaño promedio fue de 67 nm y la concentración de 23 pM. El ensayo de captación del rojo neutro en la linea celular Vero arrojó un valor de MCNC para AgNO3 de 0,0007 mM (700pM) y de 3 pM para las AgNPs sintetizadas. Las AgNPs sobre epimastigotes arrojaron un valor de IC50=1,153 pM para AgNPs a las 96 horas de tratamiento, siendo la MCNC (3 pM) letal para el 100% de los parásitos. Las células presentaron daño evidente. El control con AgNO3 presentó una tasa de inhibición absoluta. Se observó actividad oxidativa en células expuestas a la IC50. En la forma tripomastigote se logró una inhibición máxima del ≈60% a la MCNC. La concentración efectiva 50 (EC50) fue de 2,58 pM.