Caracterización molecular y epidemiología de fitoplasmas pertenecientes al grupo 16Sr XIII (Mexican periwinkle virescence group; MPV) presentes en la Argentina.

Abstract

En la presente tesis se caracterizaron epidemiológica y molecularmente, fitoplasmas pertenecientes al grupo 16SrXIII, o Mexican periwinkle virescence (MPV) presentes en la Argentina. Se trabajó sobre los patosistemas enrojecimiento letal de la frutilla y amarillamiento del paraíso. Desde el punto de vista epidemiológico, en el patosistema enrojecimiento letal de la frutilla, se determinó que la proporción (incidencia) de plantas con enrojecimiento letal (EL) está estadísticamente relacionados con los cultivares implantados y el origen de los mismos(vivero) .También fue posible relacionar estadísticamente la presencia de la enfermedad EL, con la presencia de fitoplasmas, y se demostró que esta solo puede explicar el 12.08% de los casos. A su vez se logró identificar fitoplasmas de 3 grupos 16Sr distintos (16SrIII, 16SrVII y 16SrXIII) asociados al EL. Dentro de estos grupos, se identificaron fitoplasmas pertenecientes a los subgrupos 16SrIII-J, 16SrIII-X, 16SrVII-C previamente descritos en nuestro país, y el subgrupo 16SrXIII-F, descrito por primera vez en esta tesis. El análisis de las relaciones filogenéticas de estos subgrupos, evidenciaron un parentesco cercano con fitoplasmas de la región Sudamericana, por lo que posiblemente estén siendo dispersados por vectores, de manera local. Por otro lado se detectó por primera vez la presencia del subgrupo 16SrXIII-A en Argentina, el cual solo ha sido reportado en países productores de plantas madres de frutilla (USA), por lo que se presume que el mismo ha ingresado como producto de la comercialización entre ambas regiones. Respecto al patosis tema amarillamiento del paraíso fue posible determinar con precisión la distribución geográfica del fitoplasma China tree yellows ChTYXIII (16SrXIII-C), demostrándose la presencia del mismo solo en la región del nordeste Argentino (Chaco, Formo sa, Misiones y norte de Corrientes). El análisis de los genes 16SrDNA, rpLV-rpsC y secA en distintos aislamientos geográficos del ChTYXIII permitió determinar que dicho patógeno presenta todas las condiciones para ser considerado como una nueva especie de fitoplasma denominada ‗Candidatus Phytoplasma meliae‘ Se generó un antisuero policlonal específico en contra de la proteína secA, el cual permitió localizar al ‗Candidatus Phytoplasma meliae‘ mediante inmunohistoquímica y detectarlo de manera específica. A su vez, se logró poner a punto un sistema de detección específico de dicho patógeno mediante PCR con cebadores generados a partir de secuencias del gen secA. Por último, se caracterizó molecularmente la proteína inmunodominante de membrana del tipo amp del ‗Candidatus Phytoplasma meliae‘. Dicha proteína presenta una región central hidrofílica y dos regiones transmembrana ubicadas en los extremos C-terminal y N-terminal. El análisis de identidad de las distintas regiones, reveló que la región central hidrofílica es altamente diversa, y está sometida a una presión de selección positiva. Estos resultados sugieren la participación de dicha proteína en mecanismos de interacción patógeno-hospedante.