Relación del gen spa-P de Streptococcus mutans con variables clínicas odontológicas, microbiológicas y moleculares

Abstract

Objetivo: Determinar si la variabilidad del gen spa-P se correlaciona con los índices ceod y CPOD de niños, con las UFC/mL y con los diferentes serotipos de S. mutans.Métodos: La población de estudio estuvo constituida por niños (n=45) de ambos sexos de 6-8 años de diferentes localidades de Córdoba y Madrid. Se realizó examen clínico odontológico siguiendo el procedimiento de rutina tacto-visual, registrándose los elementos dentarios sanos, cariados, con extracción indicada o perdido y obturados en dentición temporaria y permanente. Se calcularon los índices ceod y CPOD según el criterio de la OMS. Muestras de saliva estimulada fueron sembradas en Agar Mitis Salivarius para el desarrollo de S. mutans. y posterior recuento de UFC/mL. La extracción de ADN se realizó según el método de Bollet. Se identificaron los serotipos por PCR multiplex. Se amplificó por PCR y se secuenció el gen de virulencia spa-P. Se identificaron sus haplotipos con el programa DNAsp y sus relaciones genealógicas se establecieron con el método de Median-joining utilizando el programa PopArt. Para correlacionar las variantes genéticas y la experiencia de caries se aplicó análisis de Spearman utilizando el programa PAST. Protocolo aprobado por el Comité de Ética FO-UNC Nº3755/2019, sin conflicto de intereses. Resultados: Se identificaron 29 haplotipos del gen spa-P, siendo el 4 el más frecuente y compartido por cepas de 10 niños. La red reveló una combinación de haplotipos con poca diferenciación genética y otros separados por numerosas mutaciones. La correlación entre los haplotipos del gen spa-P y UFC/mL de S. mutans resultó significativa (r=0.421; p<0.01). En tanto las correlaciones entre los haplotipos con ceod+CPOD y con los serotipos no fueron significativas, (r=0.189; p=0.22) y (r=0.076; p=0.62), respectivamente. Conclusión: El gen spa-P se diferencia de otros genes de S. mutans estudiados por su elevado nivel de diferenciación genética y su correlación con la UFC/mL de S. mutans en saliva.