Vacunas : nanoestructura de tipo cristal líquido como sistema portador del adyuvante CpG-ODN para la inducción de una respuesta inmune

Abstract

Los adyuvantes aprobados para uso humano, cuando se administran con antígenos recombinantes o purificados (vacunas de la nueva generación), inducen una débil respuesta inmune celular. Por lo tanto, existe un gran interés en desarrollar nuevas estrategias adyuvantes. Oligodeoxinucleótidos sintéticos que contienen motivos CpG no metilados en un contexto particular de bases (CpG-ODN) están siendo utilizados con éxito como adyuvante en ensayos clínicos de fase I y III, pero los mismos poseen una biodisponibilidad reducida. Nosotros evaluamos la actividad adyuvante de CpG-ODN formulado en un sistema nanoestructutrado derivado de 6-0-palmitato de ascorbilo (Coa-ASC16). Los ratones inmunizados con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 (régimen de co-formulación) desarrollaron una potente respuesta inmune humoral (IgG1 e IgG2a) y celular (Th1 y Th17) específica sin generar efectos adversos. Esta respuesta fue superior a la inducida por animales inmunizados con OVA/CpG-ODN o con la formulación OVA/CpG-ODN/Al(OH)3. Además, la inmunización con OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 facilitó la generación de una respuesta inmune específica de memoria (principalmente de tipo celular) durante al menos 6,5 meses. La administración de OVA/CpG-ODN + Coa-ASC16 (régimen de co-inyección) indujo una respuesta inmune específica similar a la inducida con la administración de OVA/CpG-ODN, lo cual indica que se necesita de la formulación completa para potenciar la actividad inmunoadyuvante del oligodeoxinucleótido. Por otro lado, Coa-ASC16 por sí mismo, genera una liberación controlada de CpG-ODN y OVA in vitro e induce una respuesta inflamatoria local. Esto último, coincide con estudios recientes que demuestran que determinados biomateriales no son inmunológicamente inertes, aunque el mecanismo por el cual muchos de ellos son reconocidos por el sistema inmune innato aún no se describe por completo. El efecto inflamatorio inducido por Coa-ASC16 se caracteriza por el reclutamiento de neutrófilos y monocitos Ly6Chigh, así como por la inducción de IL-1?, IL-6 e IL-12 a nivel del sitio de la inyección. Este efecto resultó dependiente de la señalización mediada por la proteína adaptadora MyD88. Además, TLR4, TLR2, TLR7 y NLRP3 no están implicados en el reclutamiento celular ni en la producción de IL-6 e IL12. La administración de Coa-ASC16 se asocia con un aumento de la concentración de ADN de doble hebra (dhADN) en el sitio de la inyección. Frente al tratamiento previo con DNasa o en ratones Tlr9-/- no hubo modificación en el reclutamiento celular pero la producción de IL-6 se vio afectada. Por otro lado, Coa-ASC16 posee actividad adyuvante “per se”, la cual depende de MyD88 e IL-6. Nuestros resultados muestran una conexión mediada por IL-6, entre la respuesta inmune innata y adaptativa inducida por Coa-ASC16. De esta manera, Coa-ASC16 no sólo constituye una plataforma para la administración de CpG-ODN, sino también posee propiedades adyuvantes intrínsecas. Estos resultados demuestran el potencial de esta nueva formulación para el desarrollo de vacunas más eficaces. Además, la comprensión del mecanismo de acción de Coa-ASC16 es muy importante para su uso de manera más racional en el futuro.