Zn-Ftalocianinas : síntesis, caracterización y vehiculización en vesículas liposomales. Aplicaciones como fotosensibilizadores en terapia fotodinámica

Abstract

La terapia fotodinámica ha surgido como una alternativa eficaz para, el tratamiento de diversas patologías, entre ellas, varios tipos de cáncer e infecciones microbianas. Este tipo de terapia implica la acción de tres componentes: un fotosensibilizador, luz, y la presencia de oxígeno. Cuando el fotosensibilizador es excitado por la luz, genera especies reactivas de oxígeno, entre ellas oxígeno singlete, que son capaces de reaccionar con componentes celulares generando daño celular. La principal ventaja de esta terapia es que el daño se limita a la zona irradiada. En esta tesis, se realizó la síntesis de ftalocianinas, un tipo de fotosensibilizador de segunda generación, y se evaluó su actividad in vitro en terapia fotodinámica y terapia fotodinámica antimicrobiana. Con el fin de obtener ftalocianinas con diversidad estructural y de cargas, se partió desde la síntesis de sus precursores, ftalonitrilos y subftalocianinas. Se obtuvieron 12 ftalocianinas diferentes, dos de ellas catiónicas. Los resultados de la síntesis y de la caracterización por resonancia magnética nuclear, se muestran en el Capítulo 2. El Capítulo 3, contiene la caracterización a través de espectrofotometría de absorción y de fluorescencia de las ftalocianinas sintetizadas previamente. Las pruebas in vitro en terapia fotodinámica antimicrobiana y terapia fotodinámica se exponen en el Capítulo 4 y 5 respectivamente. En el Capítulo 4 se evalúa la actividad de tres ftalocianinas, dos catiónicas y una neutra, en dos bacterias Gram-negativas, una de ellas con multi resistencia a antibióticos convencionales y la otra sensible. Encontrándose una mayor actividad con las ftalocianinas catiónicas para ambas cepas. En el Capítulo 5 se muestran los resultados obtenidos con dos fotosensibilizadores en células de glioblastoma T98G, encontrándose ambos compuestos activos generando una reducción de la viabilidad celular de aproximadamente 90% y desencadenando apoptosis como principal mecanismo de muerte celular. Dos de las ftalocianinas sintetizadas, se vehiculizaron en liposomas. El Capítulo 6, contiene la síntesis y caracterización de liposomas como carriers de las ftalocianinas. La caracterización consta de espectrofotometría de absorción y fluorescencia, tamaño promedio y porcentaje de encapsulación. Además, se realizaron ensayos de estabilidad a corto y largo plazo, y de localización de la ftalocianina dentro del liposoma. Para finalizar, en el Capítulo 7 se desarrollan las pruebas in vitro realizadas utilizando ftalocianinas vehiculizadas en liposomas. En la primera parte del capítulo se muestran los ensayos correspondientes a los realizados en células de glioblastoma T98G utilizando las dos ftalocianinas vehiculizadas, mostrando una mejora en la efectividad de la terapia fotodinámica respecto a los resultados obtenidos en el Capítulo 5. En la segunda parte del capítulo se muestran los resultados correspondientes a los ensayos en bacterias Mycobacterium tuberculosis, una de ellas con resistencia a los fármacos de primera línea de elección para los tratamientos de tuberculosis. Mostrando una actividad del 99,9% en la cepa multirresistente utilizando condiciones mucho más drásticas que las necesarias para generar el mismo porcentaje de muerte en la cepa sensible.