Desarrollo de sistemas portadores para reducir las limitaciones de la terapéutica antimicrobiana disponible

Abstract

El presente trabajo de Tesis aborda el desarrollo y evaluación de sistemas portadores de fármacos antimicrobianos, utilizando una plataforma tecnológica en nuestro grupo de investigación que se basa en la utilización de polielectrolitos (polímeros ionizables) que vehiculizan fármacos de carga opuesta. Utilizamos un polímero catiónico, Eudragit E100 (EuE) y dos fármacos, vancomicina (VAN) y ciprofloxacino (CIP). Se diseñaron y prepararon los sistemas y se obtuvieron dispersiones acuosas (EuE-VAN y EuE-CIP). Se evaluaron propiedades físico químicas de interés biofarmacéutico para su potencial utilización en formulaciones de uso oftálmico. Se estudió la influencia de EuE en la eficacia antibacteriana in vitro de los fármacos vehiculizados. Los sistemas en desarrollo exhiben potenciación de la acción de VAN frente a S. aureus a la vez que exhiben acción bactericida frente a P. aeruginosa, Gram negativo considerado fuera del espectro de acción de VAN. Cabe destacar, que, a diferencia de lo descripto para otros polímeros catiónicos, EuE no exhibe actividad antimicrobiana por sí mismo. El uso de diversas microscopías evidenció alteraciones morfológicas tanto en S. aureus como en P. aeruginosa, atribuidas a la interacción de EuE con las envolturas bacterianas. El uso de VAN con un probe fluorescente puso en evidencia que tales interacciones facilitan el acceso de VAN a la capa de mureína (sitio de acción). Lo expuesto permite explicar la potenciación de EuE-VAN. Además, se implementaron estudios de eficacia antibiofilm. Se determinó un efecto EuE concentración-dependiente tanto para inhibir parcialmente la formación de biofilm de P. aeruginosa, como para reducir la actividad metabólica de células en biofilms maduros. Posteriormente, se evidenció potenciación del efecto antibiofilm de CIP vehiculizada en sistemas EuE-CIP frente a P. aeruginosa resistente a este fármaco. Posteriormente, se evaluó la selectividad del polímero frente a células eucariotas mediante diversos estudios de sensibilización in vitro. Los resultados obtenidos indican que los sistemas estudiados exhiben propiedades adecuadas para su utilización en el diseño de sistemas farmacoterapéuticos de administración oftálmica, con mayor eficacia antibacteriana y espectro ampliado respecto de los fármacos libres.