Evolución del filtrado glomerular post-nefrectomía medido por clearance de iothalamato como indicador del funcionalismo renal a corto y largo plazo

Abstract

OBJETIVO: determinar la evolución del filtrado glomerular en donantes renales vivos post-nefrectomía mediante la evaluación del clearance de iothalamato. METODOLOGÍA: una primera instancia con la evaluación del método empleado aplicando los protocolos de la Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI) Se estudió la población de donantes renales vivos del Hospital Privado Universitario de Córdoba a quienes se les haya medido previamente el filtrado glomerular con clearance de iothalamato. A los mismos, se les realiza una nueva determinación del clearance posterior a la nefrectomía junto a la evolución clínica a largo plazo. RESULTADOS: La estabilidad de las muestras de plasma y orina para la determinación de iothalamato por HPLC se determinó en 30 días y varios parámetros de la metodología fueron evaluados: La linealidad del método fue de 0 a 120 μg/mL de iothalamato en plasma y en un rango de 0 a 1000 μg/mL en orina. La determinación del Límite de Detección (LoD) fue de 0,3 μg/mL en plasma y de 0,6 μg/mL en orina. El Límite de Cuantificación del método (LoQ) fue de 1,0 μg/mL en plasma y de 2,0 μg/mL en orina. La evaluación de precisión en plasma fue de 0,9 % y de 3,9 % en orina. El Intervalo de referencia del Clearance de Iothalamato determinado por un método cromatográfico de alta resolución (HPLC), fue de 88,8 – 141,7 mL/min/1,73 m2 para el sexo femenino y de 93,7 – 147.3 mL/min/1,73 m2 para el masculino. La variabilidad biológica intra-individual (CVw) calculada de la TFG fue de 4,1 % y la variabilidad inter-individual fue de 13,1 % en el mismo grupo. El valor de referencia de cambio fue de 15,6 %. En la valoración del filtrado glomerular en Donantes renales vivos, se incluyeron en el estudio de valoración del filtrado glomerular 189 donantes quienes fueron aceptados entre el año 2007 y 2017. Las ecuaciones se proponen como la mejor alternativa para estimar el FG en población sana. Las características étnicas de la población argentina (mezcla aborigen-español-italiana) suma otro elemento que debe ser considerado. Se observó el mayor efecto de subestimación con TFG mayores a 60 mL/min/1,73m2 particularmente con MDRD, la cual clasificó erróneamente el 38,6 % de los donantes post-nefrectomía. La ecuación CKD-EPI se evidenció una subestimación en todos los rangos etarios. Los valores de compensación observados post-nefrectomía variaron entre el 62 % y 76 % entre los 3 meses y 10 años post-nefrectomía. Esto adquiere gran importancia cuando es necesaria la determinación precisa de la TFG en el cuidado como en la selección de los donantes renales con criterios expandidos. Las guías KDIGO afirman la necesidad de determinar la TFG, pero no establece la metodología más adecuada a aplicar. En el estudio se analizaron diferentes factores como posibles predictores de TFG menores a 60 mL/min/1,73 m2 post-nefrectomía. Según análisis de regresión logística, las variables que actuaban como predictoras para el mencionado criterio, eran la creatinina sérica, IMC, TFG pre-donación y la edad de los donantes menor de 50 años. Si bien se halló diferencia en el filtrado glomerular pre-donación (p<0,0001), no se encontró diferencia del mismo post-donación entre los donantes menores y mayores de 50 años, en el tiempo promedio de seguimiento de los donantes (5,8± 3,1 años). No se hallaron diferencia en el porcentaje de donantes hipertensos entre ambos subgrupos previo a la donación o post-donación (p=0,06). CONCLUSIONES: El método desarrollado y evaluado para la determinación de iothalamato por HPLC propuesto es sencillo, con la sensibilidad, precisión, exactitud, linealidad y robustez en muestras biológica de plasma y orina. Las ecuaciones de estimación muestran un bajo desempeño para el seguimiento a largo plazo del filtrado post-nefrectomía. La TFG por clearance de iothalamato brinda una medida del filtrado glomerular con mayor exactitud en la selección de donantes renales, inclusive con co-morbilidades, minimizando las exclusiones erróneas realizadas por las ecuaciones CKD-EPI o MDRD. En casos de no disponer de un método de medición de la TFG, la ecuación CKD-EPI muestra mejor desempeño que la MDRD en la población de estudio.

OBJECTIVE: to determine the evolution of glomerular filtration rate in post-nephrectomy living renal donors through the evaluation of iothalamate clearance. METHODOLOGY: a first instance with the evaluation of the method used applying the Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI) protocols. The population of living renal donors of the University Private Hospital of Cordoba was studied, whose glomerular filtration rate had been previously measured with iothalamate clearance. These donors underwent a new post-nephrectomy clearance determination together with long-term clinical evolution. RESULTS: The stability of plasma and urine samples for HPLC determination of iothalamate was determined in 30 days and several parameters of the methodology were evaluated: The linearity of the method was from 0 to 120 μg/mL of iothalamate in plasma and in a range from 0 to 1000 μg/mL in urine. The determination of the Limit of Detection (LoD) was 0.3 μg/mL in plasma and 0.6 μg/mL in urine. The method's Limit of Quantification (LoQ) was 1.0 μg/mL in plasma and 2.0 μg/mL in urine. The precision assessment in plasma was 0.9% and 3.9% in urine. The Reference Range of Iothalamate Clearance determined by a high-performance chromatographic (HPLC) method was 88.8 - 141.7 mL/min/1.73 m2 for females and 93.7 - 147.3 mL/min/1.73 m2 for males. The calculated intra-individual biological variability (CVw) of GFR was 4.1 % and the inter-individual variability was 13.1 % in the same group. The reference value of change was 15.6 %. In the assessment of glomerular filtration rate in Living Renal Donors, 189 donors were included in the glomerular filtration rate assessment study who were accepted between the year 2007 and 2017. Equations are proposed as the best alternative to estimate GFR in healthy population. The ethnic characteristics of the Argentine population (Aboriginal-Spanish-Italian mixture) add another element that should be considered. The greatest underestimation effect was observed with GFR greater than 60 mL/min/1.73m2 particularly with MDRD, which misclassified 38.6% of post-nephrectomy donors. The CKD-EPI equation showed underestimation in all age ranges. The observed post-nephrectomy compensation values ranged from 62% to 76% between 3 months and 10 years post-nephrectomy. This takes on great importance when accurate determination of GFR is necessary in the care and selection of renal donors with expanded criteria. The KDIGO guidelines state the need to determine GFR, but do not establish the most appropriate methodology to apply. In the study, different factors were analyzed as possible predictors of GFR less than 60 mL/min/1.73 m2 post-nephrectomy. According to logistic regression analysis, the variables that acted as predictors for the aforementioned criterion were serum creatinine, BMI, pre-donation GFR and donor age under 50 years. Although a difference was found in pre-donation glomerular filtration rate (p<0.0001), no difference was found post-donation between donors younger and older than 50 years, in the mean follow-up time of donors (5.8± 3.1 years). No difference was found in the percentage of hypertensive donors between both subgroups pre-donation or post-donation (p=0.06). CONCLUSIONS: The method developed and evaluated for the proposed HPLC determination of iothalamate is simple, with the sensitivity, precision, accuracy, linearity and robustness in biological samples of plasma and urine. The estimation equations show low performance for long-term follow-up of post-nephrectomy filtrate. Iothalamate clearance GFR provides a more accurate measure of glomerular filtration rate in the selection of renal donors, even with co-morbidities, minimizing the erroneous exclusions made by the CKD-EPI or MDRD equations. In cases where no GFR measurement method is available, the CKD-EPI equation shows better performance than MDRD in the study population.