Estudio de células mieloides supresoras inducidas por CpG-ODM en el envejecimiento

Abstract

Durante el envejecimiento se produce una desregulación de la respuesta inmune que se traduce en una mayor susceptibilidad a contraer infecciones, cáncer y enfermedades inflamatorias; observándose también una respuesta menos eficaz a la vacunación. Frente a estados inflamatorios perjudiciales causados por una estimulación excesiva del sistema inmune como en infecciones, cáncer, u otros, la médula ósea libera células mieloides inmaduras a la sangre. En nuestro trabajo de tesis observamos que ratones viejos normales presentan elevados números de células mieloides con fenotipo CD11b+Gr1+, las cuales presentan un mayor tiempo de vida media que las mismas células de ratones jóvenes. Cuando los ratones viejos son tratados con oligodeoxinucleótidos sintéticos que contienen motivos CpG no metilados en un contexto particular de bases (CpG-ODN) emulsionados en adyuvante incompleto de Freund (IFA), CpGODN+ IFA, se induce una expansión de células mieloides CD11b+Gr1+ en el bazo. El análisis de estas células demostró que poseen un fenotipo similar al de células mieloides supresoras. El estudio funcional nos permitió demostrar que las células mieloides purificadas de ratones viejos tratados con CpG-ODN+IFA eran capaces de suprimir la proliferación de linfocitos T de ratones normales de forma similar a las células mieloides provenientes de ratones jóvenes con igual tratamiento. El principal mecanismo involucrado en su función supresora es la inducción de arginasa, una enzima que depleta el aminoácido L-arginina del medio extracelular provocando el bloqueo de la proliferación de las células T. Adicionalmente, se evaluó la participación de IL-4 e IL-6 del microambiente de la célula T y de la célula mieloide supresora en la inducción de arginasa, tanto en ratones jóvenes como en viejos. Observamos que de acuerdo a la edad del ratón del que provienen las células mieloides, el requerimiento de las citoquinas mencionadas es diferente. Las células mieloides de ratones viejos tratados con CpG-ODN+IFA requieren de la presencia de IL-4 e IL-6 juntas para la inducción de arginasa. En el caso de las células mieloides de ratones jóvenes tratados con CpG-ODN+IFA, la sola presencia de IL-4 o IL-6, individualmente, es suficiente para la inducción de arginasa, aunque cuando ambas citoquinas se encuentran presentes se potencia la inducción de esta enzima. La expansión de la población de células con función supresora en ratones viejos se mantiene durante más tiempo (al menos hasta 40 días) luego del tratamiento con CpG-ODN+IFA. En cambio, en los jóvenes estas células hacen un pico al día 10 post tratamiento y luego disminuyen junto con su función supresora. Nuestros resultados demuestran que un estímulo inflamatorio como CpGODN+ IFA es capaz de generar la expansión de células mieloides supresoras en ratones viejos, tal vez como una forma de modular la respuesta inmune frente a este estímulo. Los resultados también demuestran que las células mieloides supresoras de ratones viejos tratados con CpG-ODN+IFA, si bien tienen características similares a las de jóvenes, se mantienen aumentadas durante más tiempo y responden de forma diferente a las citoquinas del microambiente para la inducción de arginasa.